Seleção e caracterização molecular de Bacillus Thuringiensis berliner com atividade tóxica para Trichoplusia ni (Hüebner, 1802).
Nome: EDUARDO DOMINGOS GRECCO
Tipo: Dissertação de mestrado acadêmico
Data de publicação: 27/03/2009
Banca:
Nome |
Papel |
|---|---|
| ANDERSON MATHIAS HOLTZ | Examinador Externo |
| DIRCEU PRATISSOLI | Examinador Interno |
| EDGAR SCHNEIDER | Examinador Externo |
| RICARDO ANTÔNIO POLANCZYK | Orientador |
Resumo: Trichoplusia ni é uma praga polífaga importante em plantios de brássicas, soja e algodão no Brasil. Visando reduzir a utilização de inseticidas no controle de pragas, têm-se buscado alternativas de controle, dentre as quais se destaca a utilização de Bacillus thuringiensis (Bt). O presente estudo objetivou selecionar e caracterizar
molecularmente isolados de Bt com potencial para atuar como agentes de controle biológico de T. ni. Para a execução dos bioensaios, os isolados de Bt foram cultivados em meio de cultura (BHI) a 30 oC, sob agitação orbital a 180 rpm por 72 h, sendo em seguida centrifugados 3 vezes por 20 min a 5.000 rpm, e quantificados posteriormente. Para os bioensaios de patogenicidade, uma alíquota com 3 x 108 esporos/mL de suspensão de Bt de cada isolado foi aplicada na superfície do disco
de dieta artificial, previamente distribuída em placas de acrílico com 50 lagartas, distribuídas em 5 repetições. Nos bioensaios para a obtenção da CL50, apenas os isolados com 100% de mortalidade foram pré-selecionados, sendo testadas as seguintes concentrações: 102, 5 x 102, 103, 2 x 103, 4 x 103, 6 x 103 e 8 x 103 esporos/mL, sendo os tratamentos compostos por 120 lagartas, distribuídas em 3 repetições. Os bioensaios foram mantidos em câmaras climatizadas (25 ± 1,0 oC, 65
± 10% de U.R e 14 h de fotofase) e avaliados após cinco dias. Foi utilizada caracterização molecular para detectar os genes cry1, cry2 e Vip para os isolados que obtiveram mortalidade acima de 95%. Os isolados HD1 (Btk), Bt-1043N-V, Bt- 1034F, Bt-1009K, Bt-1000 e Bt-969A causaram 100% de mortalidade genes cry estar causando a mortalidade de T. ni, nos testes de patogenicidade e CL50 de 1,17
x 103, 1,45 x 103, 1,46 x 103, 1,01 x 103, 0,94 x 103 e 1,22 x 103, respectivamente. Não foram encontrados genes cry1, cry2 e Vip nos isolados testados, podendo outros visto que os isolados testados são específicos para a ordem Lepidoptera. Esses isolados mostraram potencial para o controle de T. ni, sendo virulentos a esse inseto, com potencial para serem utilizados em programa de manejo dessa praga,
porém estudos em condições de campo e semicampo, bem como de formulação, são necessários para integrar o Bt em um programa de manejo integrado de T. ni.
